Hoefer SE615 - Handbuch (Seite 22)

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Symptom mögliche Ursache empfohlene Aktion
Zu wenig oder APS
TEMED.
APS-Stack ist nass.
O
2
in Gel-Lösung.
Lösungen bei niedriger
Temperatur.
TEMED ist alt.
Nicht genug Vernetzer.
Zuviel Bis.
Zuviel Bis.
Zu viel Katalysator:
Gel in <10 min poly-
merisiert.
Nicht genug Katalysa-
tor: Gel in >50 min
polymerisiert.
Lösungen nicht
gemischt.
Probe keine gleichen
Puffer wie Sammelgel.
Zu viel TEMED oder
APS.
SDS-Probenpuffer oder
alt ist.
Schlechte Schnittstelle
zwischen Trenngel und
Sammelgel.
Unvollständige
Polymerisation.
Gealterten Gelen oder
Acrylamid.
Gas im Gel.
Acrylamid oder Bis
enthalten Acrylsäure.
Wasser ist unrein.
8. Kein Polymerisation
von SDS-Gel
(oder unvollständige
Polymerisation.)
9. Gel zu weich.
10. Gel ist spröde.
11. Gel ist weiß.
12. Gel enthält wirbelt,
Polymerisation
Artefakte.
13. Bands sind diffus
oder breit sein.
14. Protein Mobilitäten
nicht konsistent.
15. Schwerer
Hintergrund während
der Silberfärbung.
Steigern sowohl APS und TEMED um 30-50%.
APS-Lösung ist alt. Make-up frisch APS jeden Tag.
APS ist hygroskopisch. Öffnen Sie eine neue Flasche.
Degas mindestens 10 Minuten.
Sicherstellen, dass alle Lösungen sind bei Raum-
temperatur (20-30 °C).
Verwenden Sie neue TEMED.
Vernetzer sollte 2,6% C bei Standard SDS-Gelen,
wo sein
%C = g bis × 100
(g monomer + g bis)
Siehe Nr. 9 oben.
Überprüfen Konzentrationen von Lösungen.
Siehe Nr. 9 oben.
Reduzieren Sie sowohl APS und TEMED um 25%.
Erhöhen sowohl APS und TEMED um 50%.
Siehe auch Nr. 8.
Nach gründlichem Mischen nach Hinzufügen
von TEMED.
Mit dem gleichen Puffer für die Probe für die
Stacking-Gel.
Reduzieren Konzentrationen um 25%.
Frische Lösungen verwenden.
Löschen aller Flüssigkeit von der Oberfläche
des Trenngels vor der Zugabe der Stacking-Gel-
Lösungen.
Siehe Nr. 8.
Bewahren Sie keine flüssigen Acrylamid mehr
als 3 Monate. Verwenden Sie Gele innerhalb von
1-2 Wochen von Gießen. Verwenden Sie Gele mit
Stapler sofort.
Degas Gel-Lösungen mindestens 10 Minuten.
Verwenden Sie Reagenzien wie Elektrophorese
Reinheit.
Verwenden Sie nur zweifach destilliertem Wasser.