Hoefer DQ300 - Handbuch (Seite 24)

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4.2 Linear Range und Abschrecken
Der lineare Bereich ist der Konzentrationsbereich,
in dem das Auslesen der DQ300 ist direkt propor-
tional zu der Konzentration des Fluorophors. Der
lineare Bereich beginnt mit dem kleinsten nach-
weisbaren Konzentration und erstreckt sich zu
einer oberen Grenze (Konzentration), die abhängig
von den Eigenschaften des fluoreszierenden Mate-
rials, der verwendeten Filter, und der Weglänge.
Siehe Diagramm unten.
Eine nichtlineare Beziehung wird bei höheren
Konzentrationen, wo das Fluoreszenzsignal erhöht
langsamer als die Änderung in der Konzentration
gesehen. Bei noch höheren Konzentrationen wird
Lesungen beginnen zu sinken, obwohl die Proben-
konzentrationen steigen. Dieser Effekt ist bekannt
als “Signal Abschrecken.”
Linearität kann durch Verdünnen einer Probe
1.01 oder eine andere bequeme Verhältnis (sicher
sein, eine entsprechende Stelle in den Verdün-
nungen verwenden) überprüft werden. Ist die
Probe innerhalb des linearen Bereichs, wird das
Lesen in direkter Proportion zu der Verdünnung
zu verringern. Liegt der Messwert nicht in direk-
tem Verhältnis zu der Verdünnung oder wenn
der Messwert ansteigt, wird die Probe über den
linearen Bereich des Fluorophors.
TBS-380 User’s Manual 15
A nonlinear relationship is seen at higher
concentrations where the fluorescence signal
increases slower than the change in concentration.
At even higher concentrations, readings will begin
to decrease even though the sample concentrations
are increasing. This effect is known as "signal
quenching."
Linearity may be checked by diluting a sample 1:1
or some other convenient ratio (be sure to use an
appropriate blank for the dilutions). If the sample
is within the linear range, the reading will
decrease in direct proportion to the dilution. If the
reading does not decrease in direct proportion to
the dilution or if the reading increases, the sample
is beyond the linear range of your fluorophore.
4.3 Temperature Considerations
Fluorescence is temperature sensitive. As the
temperature of the sample increases, the
fluorescence decreases. For greatest accuracy,
0
1
2
3
4
5
6
7
0 2 4 6 8 10 12
Fluorophore conc.
R
el
at
iv
e
Fl
uo
re
sc
en
ce
U
ni
t
t
Relative
Fluorescence
Einheit
Fluorophorkonzentration