Hoefer SE250 - Handbuch (Seite 18)

Hinweis: Die Seite Brunnen für
die Standards der präparativen
Kamm an die äußersten
Bohrungen durch die 10-Well-
Kamm gebildet entsprechen.
Hinweis: Die Menge an Protein
Probe in jede Vertiefung hängt
sowohl von der Empfindlichkeit
der Färbung und der Verteilung
von Protein unter den einzelnen
Bändern. Mit Coomassie Blau™,
ist es möglich, 1 µg in einem
einzigen Band zu erfassen; mit
den empfindlicheren Silber
Flecken, ist es möglich, weniger
als 10 ng erfassen.
2X-Puffer. Um Protein Proben trocknen, fügen glei-
chen Volumen Puffer und ddH
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O, um die gewünschte
Konzentration zu erzielen. Erhitzen Sie das Rohr in
kochendem Wasser für 90 Sekunden, dann entspan-
nen sie im Eis bis zum Gebrauch. Behandelten
Proben können eingefroren gelagert für künftige Läufe
werden. (Lagerung bei -40 °C bis -80 °C)
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Um in dem Laden der Proben zu unterstützen, die gut
zu benetzen Ortung Abziehbild und es auf der Vorder-
seite der Glasplatte, so dass der entsprechende Rand
skizziert die Probenvertiefungen.
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Füllen der Probenbehälter und jede obere Kammer,
die mit Puffer Laufpuffer verwendet wird. Eine obere
Pufferkammer hält ca. 75 mL.
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Unterlegen Sie die Probe in die Vertiefungen mit
einem spitzen Mikrospritze. Die Breite der Vertiefun-
gen hängt von der Anzahl der Vertiefungen pro Kamm.
Wenn der Kamm hat weniger Vertiefungen, sind sie
breiter, und erfordern mehr Volumen, um die Stufe
1 mm, wie in der folgenden Tabelle zu erhöhen.
Volumen der Probe (µl) pro 1 mm Tiefe
Anzahl der Kamm Dicke (mm)
Vertiefungen 0,75 1,0 1,5
5 9,5 12,7 19,1
9 5,8
10 3,6 4,8 7,2
15 2,2 2,9 4,4
18 2,9
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