Hinweise, puffer und volumina, Agarosegelelektrophorese notizen, Dna-mobilität – Hoefer HE33 Benutzerhandbuch
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Hinweise, Puffer und Volumina
Agarosegelelektrophorese Notizen
Agarosegelelektrophorese können DNA-
Fragmente von bis zu 0,1 kb oder weniger hat.
Polyacrylamidgele werden in der Regel für Frag-
mente kleiner als 1 kb verwendet.
DNA-Mobilität
Eingegebene Agarosekonzentration zum Auftren-
nen von Fragmenten unterschiedlicher Größe
sind in Tabelle 2 angegeben. Andere Faktoren,
die Trennung Ergebnisse umfassen die Laufpuf-
fer, Spannungseinstellung, Temperatur, Konfor-
mation und die Gegenwart von Ethidiumbromid.
Spezielle Agarosen zur Verfügung, die Auflösung
reicht verlängern.
Ein gemeinsamer Standard ist eine Hind III
verdaut von Lambda-Phagen, die acht Frag-
menten, deren Größe gibt 0,1 bis 23 kb-Paaren.
Für eine gute Auflösung, laufen 45 Minuten auf
einem 10 cm lang, 1% Agarosegel in 0,5X TBE-
Gel bei 150 V.
Tabelle 2: Agarose-Konzentrationen zur Trennung
von DNA-Fragmente mit verschiedenen Größen
Effektive Reichweite von Auflösung
Agarose (%)
von linearen DNA-Fragmente* (kb)
0,5
1,0–30
0,7
0,8–12
1,0
0,5–10
1,2
0,4–7
1,5
0,2–3
*Current Protocols in Molecular Biology, p 2.5.2 (1993)