Eppendorf G0.5 µPlate - Handbuch (Seite 28)

Berechnungen
Eppendorf
® μPlate G0.5
Deutsch (DE)
28
9.2 Leerwerte
9.2.1 Ermittlung des mittleren Leerwerts
Der mittlere Extinktionswert bei 340 nm, der für alle zur Leerwertermittlung
herangezogenen Wells ermittelt wurde, wird von dem mittleren Extinktionswert bei 260
nm bzw. 280 nm subtrahiert. Die relative Abweichung der zur Ermittlung des mittleren
Leerwerts herangezogenen Wells muss unter 10 % liegen, damit eine Messung gestartet
werden kann.
Ext
Leerwert mittel
= Ext
260 mittel
– Ext
340 mittel
[OD]
9.2.2 Ermittlung der einzelnen Leerwerte
Der Well-spezifische Extinktionswert bei 340 nm wird von dem entsprechenden
Extinktionswert bei 260 nm subtrahiert.
Ext
Leerwert A1
= Ext
260 A1
– Ext
340 A1
[OD]
Ext
Leerwert A2
= Ext
260 A2
– Ext
340 A2
[OD]
Ext
Leerwert B1
= Ext
260 B1
– Ext
340 B1
[OD]
usw.
Für jedes verwendete Well werden Informationen zu dem ermittelten Leerwert
gespeichert, wobei die Leerwertkorrektur der Proben mit dem entsprechenden
Einzelleerwert statt mit einem mittleren Leerwert erfolgt. Jedes Well, das zur
Probenmessung verwendet werden soll, muss vorher bei einer Leerwertermittlung
berücksichtigt worden sein.
9.3 Proben
9.3.1 Berechnungen auf Basis eines mittleren Leerwertes
Der Well-spezifische Extinktionswert bei 340 nm wird von dem entsprechenden
Extinktionswert bei 260 nm subtrahiert. Anschließend wird für jedes Well, das zur
Probenmessung verwendet wird, mit dem mittleren Leerwert ein Wert ermittelt.
Ext
A1
= (Ext
260 A1
– Ext
340 A1
) – Ext
Leerwert mittel
[OD]
Ext
A2
= (Ext
260 A2
– Ext
340 A2
) – Ext
Leerwert mittel
[OD]
Ext
B1
= (Ext
260 B1
– Ext
340 B1
) – Ext
Leerwert mittel
[OD]
usw.