Die elektrophorese lauf – Hoefer HE33 Benutzerhandbuch
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Die Elektrophorese Lauf
Beachten Sie die Hinweise, Puffer und Volumina
für zusätzliche Informationen.
Kühlen Sie den Boden vor dem Gebrauch, vor allem
wenn höhere Spannung Einstellungen verwendet wird
oder wenn die Trennung wird mehr als 30 Minuten
benötigen.
Hinweis: Um die Trennung Fortschritte zu überwachen,
fügen Sie entweder 0,5 µg/ml (Endkonzentration). Von
Ethidiumbromid zum Laufpuffer jetzt, oder fügen Sie
50 µg/ml (Endkonzentration). Ethidiumbromid zum
Probenpuffer. Um Fortschritte zu visualisieren, schal-
ten Sie die Stromversorgung, den Deckel abnehmen
Montage, und halten Sie einen tragbaren UV-Lampe in
der Nähe des Gels.
Hinzufügen von Ethidiumbromid an die Lauf-bzw.
Probenpuffer verlangsamt Migration leicht. Nachweis
durch diese Methode ist nicht so empfindlich wie
Färbung und die Anzeige auf einem Transilluminator.
(Siehe DNA-Nachweis, Seite 15).
Füllen beide Pufferkammern mit Laufpuffer, bis der
Puffer ~1 mm tief über das Gel. (Hierzu werden etwa
220 ml).
Legen Sie die Proben. In Probe zu 5x Ladepuffer
Probe und mischen (1/5 des letzten Bandes wird
geladen Puffer, siehe Seite 14). Verwenden Sie einen
Mikropipette, um jede Probe zu laden, wobei darauf
zu achten Punktion der Unterseite gut oder Einfangen
keine Blasen.
Setzen Sie den Deckel, so dass die Kathode (–) schwar-
ze Leitung am Ende der Probe am nächsten ist gut.
(Nukleinsäure-Proben in Richtung der Anode wandern
(+) Mennige. Schließen Sie die farbcodierten Leitungen
(rot zu rot, und schwarz auf schwarz) zu einem zuge-
lassenen Stromversorgung, wie zB die PS300B. Stellen
Sie den Spannungspegel und Timer (wenn verfügbar)
gemäß dem Grad der Auflösung gesucht.
Vorsicht: Ethidiumbromid ist
ein Mutagen bekannt. Tragen
Sie immer Handschuhe beim
Umgang.
UV-Schutzbrille tragen und
schützen die Haut bei der
Verwendung eines UV-Lampe.
Hinweis: Wenn kein Farbstoff an
das Kühlmittel aufgenommen
wurde, legen Sie die Basis auf
einem dunklen Hintergrund, um
die Wells leichter zu sehen.
Hinweis: Bei der maximalen
Einstellung das Gerät
beginnt Überhitzung, sobald
der Boden gekühlt erreicht
Umgebungstemperatur. Falls die
Überhitzung nicht kontrolliert
wird, wird das Gel zu schmelzen
und/oder der Unterseite des
Geräts wird verformen!