Luminex FLEXMAP 3D Hardware User Manual - Handbuch (Seite 25)

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KAPITEL 2
Technischer Überblick
In diesem Kapitel werden die technischen Aspekte des Luminex FLEXMAP 3D-Systems
behandelt. Betrieb, Systemkomponenten, Untersysteme, empfohlene Zusatzgeräte
und Spezifikationen.
Funktionsweise des
FLEXMAP 3D-Systems
Das FLEXMAP 3D-System in Kombination mit der xMAP®-Technologie (Multi-Analyte
Profiling) misst bis zu 500 Analyten gleichzeitig aus einer einzigen Probe. Die xMAP-
Technologie verfügt über Mikrokugeln, proprietäre Farbstoffmischprozesse,
Durchflusszytometrie-basierte Fluidik, Laser, die neuesten digitalen
Hochgeschwindigkeitssignal- und Computeralgorithmen, die ein Multianalyt-
Nachweissystem mit hervorragender Empfindlichkeit und Spezifität bilden.
Ein von Luminex entworfener proprietärer Prozess zur Färbung von Polystyrol-
Mikrokugeln mit mehreren Fluorophoren vereinfacht die Erstellung von 500
unterscheidbaren Mikrokugeln, wenn diese Fluorophore in unterschiedlichen
Konzentrationen kombiniert werden. Die farblich unterschiedlichen Mikrokugeln werden
von zwei Lasern im FlexMAP 3D-Instrument angeregt. Die resultierende Emission wird
von Avalanche-Fotodioden (AFD) in drei Bestimmungskanälen (CL1, CL2 und CL3)
erkannt und dann mithilfe einer separaten AFD in einem DD-Kanal (Doublet Discriminator)
weiter analysiert, der die Größe der Mikrokugeln durch Seitenstreuung misst.
Analyten werden unter Verwendung derselben Chemismen früherer Luminex-Instrumente
(LX100/200) an die Oberfläche der xMAP-Mikrokugeln gebunden. Reporter mit
Fluoreszenzmarkierungen, die mit anderen Wellenlängen als die internen
Farbmischungen angeregt werden, werden an die interessierenden Analyten gebunden
und von einer Fotomultiplierröhre (Photomultiplier Tube, PMT) in einem Reporterkanal
(RP1) erkannt, wodurch eine quantitative Analyse ermöglicht wird. Wenn die Mikrokugeln
die Laserstrahlen schnell in einem Flüssigkeitsstrom durchqueren, wird mithilfe von
digitalen Hochgeschwindigkeitssignal- und Computeralgorithmen erkannt, welcher Analyt
an die einzelnen Mikrokugeln gebunden ist, und die Reaktion wird basierend auf dem
fluoreszierenden Reportersignal quantifiziert. Die Resultate werden von der
Systemsoftware analysiert und in einem benutzerfreundlichen Format zur
Analyse ausgegeben.