Luminex xPONENT 4.1 and MAGPIX - Handbuch (Seite 21)

Abbildung 1. Bestimmung der MagPlex ® -Mikrokugeln durch die rote und
die grüne LED
1. Grüne LED 2. Kamera
3. Kammer 4. Rote LED
Wiederholungsmessungen mit MagPlex-Mikrokugeln
In einem MagPlex-Assay ist das Reportersignal das Ergebnis des Assays. Aufgrund der
geringen Größe der Mikrokugeln weist eine MagPlex-Mikrokugelsuspension eine
Reaktionskinetik auf, die der Lösungsphase ähnelt. Das bedeutet, dass jeder Satz von
Mikrokugeln, der für ein bestimmtes Assay verwendet wird, eine statistisch gleichmäßige
Verteilung der an der Oberfläche jeder Mikrokugel gebundenen Reportermoleküle aufweist.
Das Fluoreszenzsignal der an der Oberfläche jedes Mikrokugelsatzes gebundenen
Reportermoleküle wird gemessen und dient der Bestimmung des Ergebnisses für jedes
Assay in einem Multiplex. Während der Datenerfassung werden zahlreiche Mikrokugeln
jedes Satzes analysiert. Dann wird die Medianstatistik für diesen Satz von xPONENT
errechnet. Je mehr Mikrokugeln eines Satzes gemessen werden, desto zuverlässiger ist die
jeweilige Messung. Luminex empfiehlt die Verwendung von R-Phycoerythrin als Reporter-
Fluorophor.
Wenn Sie ein MagPix-Kit ausführen, befolgen Sie die Anweisungen der Produktbeilage des
Kits, oder verwenden Sie das mitgelieferte Softwareprotokoll.
Bestimmungs- und Reporter-Fluorochrome
MagPix-Kügelchen im Kalibrierungskit werden zur automatischen Fokussierung der Kamera
und zur Kalibrierung der Kanäle CL1, CL2 und RP1 verwendet. Die Kügelchen im Prüfungskit
sind eine Mischung aus 6 verschiedenen Regionen, die den Bereich der 50-plex-Anordnung
abdecken. Sowohl die Kalibrierungs- als auch die Prüfungskügelchen verfügen über drei
Farbstoffe, und die Fluoreszenzsignale dieser Farbstoffe ermöglichen die Bestimmung jedes
Mikrokugelsatzes.
xPONENT für MAGPIX
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