Jenway 7315 Manual German - Handbuch (Seite 16)

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ABScHnItt 3 – theorie und Praxis spektroskopischer Messungen
3.1 tHEORIE DER SPEKtROSKOPIScHEn MESSUnG
UV-VIS-Spektroskopie ist die Messung der Absorption von Licht einer bestimmten Wellenlänge in einer
Probe. Dies wird verwendet, um das Vorhandensein und die Konzentration der Wirkstoffe in der Probe
zu identifizieren. Das Lambert-Beer‘sche-Gesetz wird angewendet, um die Absorption von Licht mit den
Eigenschaften der Probe, durch die das Licht dringt, in Beziehung zu setzen. Das Lambert-Beer‘sche-Gesetz
besagt, dass:
A die Absorption ist
der molare Absorptionskoeffizient ist (l mol -1 cm -1 )
c die Konzentration ist (mol l -1 )
l die Pfadlänge (cm) ist
Dieses Gesetz zeigt das lineare Verhältnis von Absorption zu Konzentration; dies gilt jedoch nur für niedrige
Konzentrationen. Bei einem Absorptionsniveau größer 3 weicht die Konzentration von der Linearität ab.
Transmission ist der Anteil des Lichts, das die Probe durchdringt:
Deshalb: T = I
t
I
o
Die Absorption verhält sich umgekehrt proportional zur Transmission:
A = Log 1
T
3.2. SPEKtROSKOPIScHE MESSUnG
Ein Spektrophotometer besteht aus vier Hauptkomponenten: Einer Lichtquelle, die eine hohe und
konstante Energiemenge über den gesamten Wellenlängenbereich emittiert, einem Verfahren zur
Abtrennung des Lichtes in diskrete Wellenlängen; einem Probenhalter und einem Licht-Detektor.
Wobei:
L
o
das einfallende Licht ist
l
t
das durchgeleitete Licht ist
l die Weglänge ist
l
I
o
I
t
l