Hoefer SE640 - Handbuch (Seite 19)

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Acrylamidgelen
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Bereiten Sie die Monomerlösung und gießen
Sie den Gel
Bereiten Sie die benötigte Menge an Monomer-
Lösung. Entlüften und fügen Sie den Initiator und
Katalysator unmittelbar vor dem Gießen des Gels.
Pipettieren Sie die Lösung in einer Ecke des Sand-
wich, wobei darauf geachtet, dass keine Luftblasen
einzuführen. Weiter unten finden Sie die passende
Lösung Niveau entsprechend der Anwendung.
Kein Sammelgel (Continuous System)
Füllen Lösung bis knapp unterhalb der Oberkante der
oberen Plattenkante. Wenn Blasen gefangen sind, mit
einer Pipette oder Spritze entfernen. Einführung eines
Kamms (in einem leichten Winkel) in jedem Sand-
wich, dabei nicht um Luftblasen unter den Zähnen zu
fangen.
Club-Sandwich
Pipettieren der Lösung in beiden Sandwiches, Füllen
jeder auf das gleiche Niveau unterhalb des gezahnten
Randes.
Stacking-Gel
Füllen Lösung für 3-4 cm unterhalb der Oberkante
der Glasplatte. Diese Höhe ermöglicht einen 1 cm
Sammelgel unter dem Brunnen. Gießen Sie das Gel
ein und bringen ein Overlay (siehe Schritt 2). Nach-
dem das Gel gesetzt ist, bereitet die Stacking-Gel, wie
unten beschrieben.
2-D Elektrophorese (mehrteilige Proteinsystem).
Füllen Monomerlösung bis etwa 1 cm unterhalb des
Kopfes der Glasplatte zu ermöglichen 4-5 mm für die
IPG-Streifen oder Schlauch Gel und einer Agarose-
Dichtung. (A Sammelgel erfordert mehr Platz). Ver-
schließen Sie den IPG-Bandes oder des Schlauches
Gel an Ort und Stelle mit Agarose in Laufpuffer
gelöst. Darauf achten, dass eine blasenfreie zwischen
der ersten und zweiten Dimension Gele.