Hoefer SE640 - Handbuch (Seite 40)

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6. 0,375 m TrisCl, 0,1% SDS, pH 8,8
(Trenngel Overlay, 100 ml)
1,5 M Tris-Cl, pH 8,8 (Soln. #2) 0,375 M 25,0 ml
10% SDS (Soln. #4)
3,5 mM 1,0 ml
Deionisiertes H
2
O bis 100,0 ml
-oder-
Wasser gesättigtem n-Butanol
Shake n-Butanol und entionisiertes in einem Scheidetrichter
H2O. Entfernen Sie die wässrige (untere) Phase. Wiederho-
len Sie diesen Vorgang mehrmals. Verwenden Sie die obere
Phase.
-oder-
Wenn eine Überlagerung stört das bevorzugte Protokoll, isolie-
ren des Gels von Luftsauerstoff, indem eine leere Kamm oder
die Lösung Gelbildners auf dem Gel.
7. 2X Probenbehandlung Puffer
(0,125 M TrisCl, 4% SDS, 20% Glycerin,
2% 2-Mercaptoethanol, pH 6,8, 10 ml)
0,5 M Tris-Cl, pH 6,8 (Soln. #3) 0,125 M 2,5 ml
10% SDS, 0,35 m (Soln. #4)
0,14 M 4,0 ml
Glycerin (FW 92,09) 20% v/v 2,0 ml
2-Mercaptoethanol (FW 78,13) 2% v/v 0,2 ml
[-OR-Dithiothreitol (DTT) 0,2 mM 0,31 g]
(FW 154,2)
Bromphenolblau (FW 691,9)
0,03 mM 0,2 mg
Deionisiertes H
2
O bis 10,0 ml
Teilen Sie sich in 1,0 ml Aliquots und lagern bei -40 °C bis
-80 °C.
-oder-
6X Probenbehandlung Puffer
(0,35 M TrisCl, 10% SDS, 30% Glycerin, 9,3% DTT,
pH 6,8, ~10 ml)
0,5 M Tris-Cl, pH 6,8 (Soln. #3) 0,35 M
7,0 ml
SDS (FW 288,4) 0,35 M 1,0 g
Glycerin (FW 92,09) 30% v/v 3,0 ml
DTT (FW 154,2) 0,6 M 0,93 g
Bromphenolblau (FW 691,9) 0,175 mm 1,2 mg
Teilen Sie sich in 1,0 ml Aliquots und lagern bei -70 °C