Gradientengele – Hoefer SE640 Benutzerhandbuch
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Gradientengele
Sowohl lineare und exponentielle Gradienten Gele
können im dualen Gelgießstand gegossen werden.
Wir empfehlen die Verwendung eines Hoefer SG-
Serie Gradient Maker. Gradient Gele werden mit
einer Kanüle von der Spitze des Dual Gel Caster
(siehe Abb. 5) gegossen. Ein Stacking-Gel wird
dann über den Gradienten-Gel gegossen.
Gießen eines linearen Gradienten Gel
1
Montieren Sandwich(n) in das duale Gelgießstand wie
auf Seite 8 beschrieben.
2
Richten Sie die Monomerlösung Fließweg
Ausführen einer Länge von Tygon
™
Schlauch
durch eine peristaltische Pumpe. Ein Ende des
Schlauchs an der Steigung Maker Auslaßöffnung
und dem anderen Ende mit einer 9 cm Kanüle.
(Die OD der Kanüle muss kleiner sein als der
Abstandshalterdicke.) Platzieren der Kanüle, so dass
es an der Unterseite des Sandwich, in der Mitte
zwischen den Abstandshaltern liegt.
3
Bereiten Sie die Monomer-Lösung
Berechnen Sie das Volumen der Monomer-Lösung
benötigt. Teilen Sie das Gesamtvolumen in der Mitte
und bereiten dieses Volumen sowohl der höheren und
niedrigeren Prozentsatz Acrylamid-Lösungen.
Abb. 5. Gießen eines Gradienten-Gel.
Die Gel-Lösung kann in das Gel
durch eine Sandwich-Pipettenspi-
tze mit einer Geschwindigkeit, die
einen kontinuierlichen Strom hält
eingeführt werden.
Optional: Einstellen der
höherprozentigen Acrylamid-
Lösung zu 15% (w/v)
Saccharose oder 25% (v/v)
Glycerin Schichten zu
verbessern.