Probenvorbereitung und loading – Hoefer SE640 Benutzerhandbuch
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Probenvorbereitung und Loading
Die Probe kann entweder geladen werden,
während das Sandwich in der Nachlauf oder nach
dem oberen Pufferkammer befestigt ist. Beim
Laden von Proben während der Verwendung
Teilerplatten, müssen die Proben ohne die obere
Pufferkammer an Ort und Stelle geladen werden.
Die Menge der Probe geladen wird, hängt von
der Dicke des Gels, der Empfindlichkeit des
Nachweisverfahrens verwendet, und der Menge
der Probe in jedem Band zu erwarten. In einem
kontinuierlichen Puffer-System, sollte das Pro-
tein Probe relativ konzentriert werden, da keine
Stacking-Gel verwendet wird. In einer diskon-
tinuierlichen Puffersystems, die Zone, in die jede
molekulare Spezies wandert durch die Stacking-
Gel ist zugespitzt, so daß die Probe braucht nicht
so konzentriert werden.
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Bereiten Sie die Wells
Nehmen Sie den Kamm durch sanftes Schütteln es
einer Seite zur anderen und dann gerade nach oben,
um eine Beschädigung der Wände gut. Spülen Sie jede
Kavität mit destilliertem Wasser auf unpolymerisierten
Acrylamid zu entfernen und dann abtropfen durch
Invertieren des Gel-Sandwich (oder Nachlauf). Füllen
Sie jede gut mit Elektrophorese-Puffer.
Hinweis: Die mit Coomassie
Blue
™
ist es möglich, 1 µg
Protein in einem einzigen
Band zu erkennen. Mit den
empfindlicheren Silber Flecken,
ist es möglich, weniger als
10 ng Protein nachzuweisen.