Eppendorf FemtoJet - Handbuch (Seite 23)

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3 Bedienung und Arbeitstechnik
3.4.1 Kompensationsdruck p
c
Der Kompensationsdruck p
c
sorgt dafür, dass kein Medium in die Kapil-
lare einströmt. Durch Kapillarkräfte würde Flüssigkeit aus der Zellkultur-
schale in die Injektionskapillare einfließen und so das Injektionsgut
verdünnen. Um dieses zu verhindern, wird ein permanenter Kompensati-
onsdruck p
c
eingestellt. Er sollte so gewählt werden, dass ein permanen-
ter leichter Ausfluss aus der Injektionskapillare erfolgt. Wie hoch der
Druck im Einzelfall sein muss, ist in einem Vorversuch zu ermitteln. Bei-
spielsweise kann ein Fluoreszenzfarbstoff in die Kapillare gefüllt werden,
der eine direkte Beobachtung des Ausflusses ermöglicht. Der erforderli-
che Druck ist stark abhängig von der Oberflächenspannung und der Vis-
kosität des Injektionsguts. Erfahrungsgemäß sind bei der Verwendung der
gebrauchsfertigen Injektionskapillaren Eppendorf Femtotips

Kompensa-
tionsdrücke zwischen 30 hPa und 300 hPa (0,44 – 4,4 PSI) sinnvolle
Werte.
Druckverhältnisse in der Kapillare
3.4.2 Injektionsdruck p
i
Der Injektionsdruck p
i
liegt während des Injektionsvorgangs an. Dieser
Druck ist in der Regel höher als der Kompensationsdruck. In vielen Fällen
ist für Femtotips

ein Druck zwischen 50 hPa und 500 hPa
(0,73 – 7,2 PSI) sinnvoll. Das injizierte Volumen ist abhängig vom Injek-
tionsdruck und der Injektionszeit. Der Injektionsdruck muss größer sein
als der Innendruck der Zelle, in die injiziert werden soll. Ein Aufblähen der
Zelle oder des Zellkerns während der Injektion ist jedoch ein sicheres
Zeichen für einen zu hohen Injektionsdruck.
Das gelegentliche Anspringen des Kompressors während der Arbeit
beeinträchtigt die Funktion des FemtoJet

nicht. Es steht – auch während
der Kompressor den Druckvorrat auffüllt – jederzeit Druck bis zum
Maximalwert von 6 000 hPa (ca. 87,0 PSI) zur Verfügung.
Kapillarsog
Kompensationsdruck p
c
Hydrostatischer Druck P
hyd
03_Bedien.fm Seite 21 Mittwoch, 27. September 2006 4:40 16