Hoefer SE600 - Handbuch (Seite 20)

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Acrylamidgelen
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Bereiten Sie die Monomerlösung und gießen
Sie den Gel
Bereiten Sie die benötigte Menge an Monomer-
Lösung. Entlüften und fügen Sie den Initiator
und Katalysator unmittelbar vor dem Gießen des
Gels. Pipettieren Sie die Lösung in einer Ecke
des Sandwich, wobei darauf geachtet, dass keine
Luftblasen einzuführen. Weiter unten finden Sie
die passende Lösung Niveau entsprechend der
Anwendung.
Kein Sammelgel (Continuous System). Füllen Lösung
bis knapp unterhalb der Oberkante der oberen
Plattenkante. Wenn Blasen gefangen sind, mit
einer Pipette oder Spritze entfernen. Einführung
eines Kamms (in einem leichten Winkel) in jedem
Sandwich, dabei nicht um Luftblasen unter den
Zähnen zu fangen.
Club-Sandwich. Pipettieren der Lösung in beiden
Sandwiches, Füllen jeder auf das gleiche Niveau
unterhalb des gezahnten Randes.
Stacking-Gel. Füllen Lösung für 3 - 4 cm unterhalb
der Oberkante der Glasplatte. Diese Höhe ermöglicht
einen 1 cm Sammelgel unter dem Brunnen. Gießen
Sie das Gel ein und bringen ein Overlay (siehe
Schritt 2). Nachdem das Gel gesetzt ist, bereitet die
Stacking-Gel, wie unten beschrieben.
2-D Elektrophorese (mehrteilige Proteinsystem).
Füllen Monomerlösung bis etwa 1 cm unterhalb
des Kopfes der Glasplatte zu ermöglichen 4 - 5
mm für die IPG-Streifen oder Schlauch Gel und
einer Agarose-Dichtung. (A Sammelgel erfordert
mehr Platz). Verschließen Sie den IPG-Bandes
oder des Schlauches Gel an Ort und Stelle mit
Agarose in Laufpuffer gelöst. Darauf achten, dass
eine blasenfreie zwischen der ersten und zweiten
Dimension Gele.