Hoefer SE600 - Handbuch (Seite 31)

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Hinweis: Alle Geräte der Serie
SE600 verwendet 18-cm-breite
Platten. Das Gel Dicke
bestimmt den Querschnitt (und
Strombedarf) für konstanten
Strom fließt. Die Länge der
Platte bestimmt die Laufzeit.
Trennung der Probe
Elektrophorese-Parameter für den
diskontinuierlichen Polyacrylamidgelen
Gele können entweder bei konstantem Strom
oder konstanter Spannung Einstellungen
ausgeführt werden. Ein konstanter Strom-Modus
wird traditionell mit einer diskontinuierlichen
Puffersystems verwendet, so dass die Rate
der elektrophoretischen Wanderung bleibt
während der Laufzeit. Unter diesen Bedingungen
Spannung zunimmt, wenn die Erlöse Lauf. Eine
niedrigere aktuelle Einstellung wird für höhere
Auflösung empfohlen. Die optimale aktuellen
Niveau muss empirisch ermittelt werden; die
Hauptfaktoren, die ausgeglichen werden müssen,
sind die Gel-Konzentration und Geschwindigkeit
der Migration, und die daraus resultierende
Joulesche Erwärmung und Band Verzerrung. In
Tabelle 2 sind Ausgangspunkt Richtlinien und
Anpassungen für Geldicke, Anzahl der Gele, der
und Migration.
Strom
Übliche wirkt auf den gesamten Querschnittsfläche
aller Gele, da die Gele, die parallel in der elektrischen
Schaltung verbunden sind. So ist die aktuelle
Einstellung für ein Gel ist durch die Anzahl der Gele
der gleichen Querschnitt gleichzeitig ausgeführt
werden multipliziert. Für ein Gel 1,5 mm dick,
empfehlen wir einen Ausgangspunkt aktuelle
Einstellung von 25 mA. (Zwei 1,5 mm Gele = 50 mA.)
Hinweis: Kühlung erforderlich sein, um Joulesche
Erwärmung zu steuern.
Spannung
Die Ausgangsspannung für eine 1,5 mm Slab-Gel mit
einem Netzteil, auf 25 mA beträgt gewöhnlich 80
bis 90 V (mit dem SE600 mit einem Laemmli-Puffer
für diskontinuierliche SDS-Gelen). Die endgültige
Spannung typischerweise 250 bis 400 V, je nach der
Länge des Gels. (Siehe Tabelle 3).
Tabelle 3: Laemmli-
Puffer-System Ausgangspunkt
Richtlinien
Geldicke*
1,5 mm
Strom pro Gel † 25 mA
Konstant-
stromquelle
Anlaufspannung ‡ 80 – 90 V
Finale Spannung 220 – 250 V
* Dicker oder dünner Gele benötigen sie
proportional mehr oder weniger Strom.
Zum Beispiel erfordert eine 0,75 mm Gel,
das halb so dick wie ein 1,5 mm-Gel ist,
halb so viel Strom, oder 12,5 mA.
† Der Strom muss durch die Anzahl der Gele
zu multiplizieren. Zum Beispiel, wenn
zwei Club-Sandwiches installiert sind,
benötigen die vier Gele viermal so viel
Strom. Der Strom kann für eine schnellere
Läufe erhöht werden, wenn eine aktive
Kühlung verwendet wird, und es kann für
langsamere Nacht läuft verringert werden.
‡ Bei 25 mA pro Gel.