Hoefer SE600 Benutzerhandbuch
Seite 38
•
p30
Schlechte
Band-Auflösung
Laufbedingungen
Elektrophorese starten, sobald die Probe geladen wird, um
Spezies mit niedrigem Molekulargewicht diffundieren zu
verhindern.
Führen Sie den Abstand zu einem niedrigeren Strom-oder
Spannungs-Einstellung, um Joulesche Erwärmung zu
reduzieren.
Reagenz-Qualität
Verwenden Sie nur die hochwertigsten Reagenzien.
Schlechte Stapeln
Verwenden Sie nur Gele, die vor kurzem hergestellt wurden.
Fügen Sie eine Stacking-Gel oder erhöhen Höhe des
Stacking-Gel. Bereiten Sie das Auflösungsvermögen-
Gel-Oberfläche, die durch erste Spülung mit Stacking-
Gel-Monomer vor dem Gießen des Stacking-Gel, um die
Kontinuität zwischen den Gelen zu gewährleisten.
Überprüfen Sie pH-Werte der Lösung-und Stapel-Gel-
Lösungen. Nicht zurück-titriert Puffer.
Unvollständige
Gelpolymerisation
Erlauben Gel vollständig zu polymerisieren.
Probenvorbereitung
Bewahren Probe auf Eis, bevor es denaturiert ist.
Dialysieren oder Entsalzung der Probe.
Wärme Proben in SDS-Probenpuffer für nicht mehr als 1–2
min bei 100 °C, um die Dissoziation von Untereinheiten zu
verbessern. Bewahren Sie nach dem Erhitzen auf Eis.
Passen Sie das Probenvolumen oder Konzentration.
Fügen Sie weitere Mercaptoethanol oder Dithiothreitol;
überprüfen Probe Behandlung.
Protease-Inhibitoren, wie zB PMSF ggf. proteolytischen
Abbau der Probe zu verhindern.
Steigern Glycerin oder Saccharose zu Probe-Dichte zu
erhöhen.
Shop Proben in Aliquots eingefroren werden, um zu
vermeiden, wiederholtes Einfrieren und Auftauen. Bewahren
Sie bei -40 bis -80 °C
problem
verursachen
abhilfe