Hoefer SE600 Benutzerhandbuch
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Zeit
Ein Lauf ist abgeschlossen, wenn die Markerfarbstoff
erreicht den Boden des Gels. In einer 16-cm Gel
(SE600), einem 1,5 mm dicken Laemmli-SDS-Gel bei
25 mA / Gel ohne Kühlung ausgeführt, üblicherweise
5 Stunden. Längere Gele benötigen sie proportional
mehr Zeit; Trennungen in 24-cm-Gelen (SE660)
benötigen 8 Stunden.
Elektrophorese Parameter für DNA / Acrylamid-
Gelen
DNA-Gele werden in der Regel bei einer konstanten
Spannung Einstellung ausgeführt, und da
Puffersysteme kontinuierlich sind, bleiben beide
Strom und Spannungswerte über die gesamte Auflage
konstant. Laufbedingungen sind in Einheiten von V
/ cm ausgedrückt. Verlag ausgeführt Bedingungen
schwanken, aber Spannungen im Bereich von 1 bis 3
V / cm für Übernacht gemeinsamen läuft. Im SE600,
haben wir Gele bei ausgeführt bis zu 12,5 V / cm.
(Die Kühlung erfolgt bei dieser Spannung Ebene
erforderlich.)
Zeichne jeden Lauf
Halten Sie eine Aufzeichnung des Strom-oder
Spannungs-Einstellung, Anzahl und Dicke der Gele,
Puffer-System und den Ausgangs-und abschließende
Strom oder Spannung Lesungen für jeden Lauf,
so dass Ergebnisse verglichen werden können.
Widersprüchliche Ergebnisse für das gleiche System
und Einstellungen zeigen mögliche Probleme wie
undichte Strom, falscher Puffer-Konzentrationen, hohe
Salzkonzentrationen oder inkonsistent chemische
Qualität.
Überprüfen Band Fortschritt nach 5 min, und wieder
nach 1 h, ein Auge auf die Wanderungsgeschwindigkeit
des Tracking-Farbstoff. Die Strecke ist abgeschlossen,
wenn die Markerfarbstoff erreicht den Boden des Gels.
Sehen Sie sich das Puffer-Ebene und, wenn nötig,
ergänzen es als erforderlich, um die obere Elektrode
unter Wasser zu halten. (Ein kleines Volumen von
Puffer kann an einer Platte eingekerbt oder Dichtung
oder Puffer auslaufen kann durch das Gel passieren.)
Achtung! Nach anfänglichen
Überwachung, nicht verlassen,
das Gerät unbeaufsichtigt länger
als 1 h vor der Überprüfung der
Fortschritte der Bands und der
Puffer Ebene.