Jenway Genova Plus German Benutzerhandbuch
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Die Nucleinsäurenkonzentration kann auch über die folgenden Berechnungen abgeschätzt werden:
Konz. (µg/ml) = (Abs bei 260 nm x 62,9) – (Abs bei 280 nm x 36,0)
Konz. (µg/ml) = (Abs bei 260 nm x 49,1) – (Abs bei 230 nm x 3,48)
Der Bezug auf einen Blindwert, bei dem keine Absorption auftreten sollte, ist in aller Regel erforderlich. Bei
dem Genova Nano beträgt die Standard-Referenzwellenlänge 320 nm, sodass die Benutzer den gemessenen
Absorptionswert in alle Nucleinsäurenberechnungen einbeziehen können. Die Standardwellenlänge von 320 nm
kann bei Bedarf geändert werden.
3.3
SPEKTROSKOPISCHE MESSUNGEN
Das Spektralphotometer besteht aus vier Hauptkomponenten. Eine Lichtquelle, die polychromatisches Licht hoher
und konstanter Energie über den gesamten Wellenlängenbereich aussendet; ein Verfahren zur Aufteilung des Lichts
in diskrete Wellenlängen; ein Probenhalter und ein Lichtdetektor.
Die folgende Darstellung zeigt den optischen Aufbau des Spektralphotometers Genova Plus:
Abbildung 3.3.1 – Darstellung des Lichtwegs
Das Licht aus der vorher ausgerichteten Xenon-Lampe wird auf ein Gitter mit 1200 Linien pro Millimeter
fokussiert, das das Licht in diskrete Wellenlängen aufteilt. Das abgelenkte Licht durchläuft eine weitere Schlitz- und
Linsenanordnung, bevor es von links nach rechts durch die Probe in der Probenkammer hindurchtritt. Das Licht, das
nicht von der Probe absorbiert wurde, tritt durch eine Sammellinse hindurch und trifft auf einem Signaldetektor
auf. Das Ausgangssignal des Photodiodendetektors, der sich direkt auf der Detektor-Leiterplatte befindet, wird zur
Berechnung der % Transmission herangezogen. Das Ergebnis wird entweder als % Transmission oder Absorption
auf dem Gerätedisplay angezeigt.
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Lampe
Probe
Sammellinse
Kollimatorspiegel
Detektor
Eintrittsspalt
Gitter
Austrittsspalt