Hoefer IEF100 - Handbuch (Seite 59)

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Rezepte
IEF Probenextraktionspuffer für 2D
1A. Urea Sample Buffer-Lösung
Bereitet 25 ml
9,5 M Harnstoff, 4% CHAPS
Endkonzentration Betrag
Urea (FW 60,06) 9,5 M 14,26 g
CHAPS 4% (w/v) 1,0 g
VE-Wasser bis 25 ml
Shop in 1 ml Aliquots bei -20 °C oder darunter.
Vor der Verwendung hinzugefügt 6 mg/ml DTT, um eine endgültige Proben-
puffer Zusammensetzung von 40 mM DTT zu erhalten.
Optional: Hinzufügen von Träger-Ampholyten, wie SERVALYTS, auf eine
Konzentration von 2% v/v (20 μl pro ml Probenpuffer-Lösung).
- ODER -
1B. Thioharnstoff + Urea Probenvorbereitung Lösung
Bereitet 25 ml
7 M Harnstoff, 2 M Thioharnstoff, 4% CHAPS, 40 mM DTT
Endkonzentration Betrag
Urea (FW 60,06) 7 M 10,51 g
Thioharnstoff (FW 76,12) 2 M 3,8 g
CHAPS 4% (w/v) 1,0 g
VE-Wasser bis 25 ml
Shop in 1 ml Aliquots bei -20 °C oder darunter.
Vor der Verwendung hinzugefügt 6 mg/ml DTT, um eine endgültige Proben-
puffer Zusammensetzung von 40 mM DTT zu erhalten.
Optional: Hinzufügen von Träger-Ampholyten, wie SERVALYTS, auf eine
Konzentration von 2% v/v (20 μl pro ml Probenpuffer-Lösung).