Referenzmessungen, 1 co2 referenzmessung, 1 co – BINDER CB 60 Benutzerhandbuch

Seite 101: Referenzmessung, 1 messung der co

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CB (E6) 09/2013

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16. Referenzmessungen

Referenzmessungen für Temperatur, CO

2

und O

2

(Gerät mit O

2

Regelung) können über eine Silikon-

Messdurchführung (N) in der inneren Glastür durchgeführt werden. Referenzmessungen der Temperatur

werden grundsätzlich im thermisch stabilen Zustand und bei geschlossenen Gerätetüren durchgeführt.

16.1 CO

2

Referenzmessung

Üblicherweise wünschen Anwender die Durchführung von Referenzmessung zwischen den jährlichen

Wartungsintervallen. Hierfür eignen sich prinzipiell 3 Möglichkeiten um die CO

2

Konzentration im Innern

des CO

2

-Inkubators zu messen. Diese werden in Kap. 16.1.1 bis 16.1.3 beschrieben.

16.1.1 Messung der CO

2

Konzentration indirekt über den pH-Wert der Zellkultur

Die CO

2

Konzentration im Innern des CO

2

-Inkubators kann indirekt über den pH-Wert des Nährmediums

bestimmt werden. Dies ist eine einfache Methode, um die CO

2

Konzentration ohne spezielle Ausstattung

zu prüfen. Man benötigt lediglich einen genauen pH-Indikator oder eine pH-Messelektrode, was zur Stan-

dardausstattung in Zellkulturlabors gehört.
Diese Methode basiert auf dem Säure-Base Gleichgewicht des Puffersystems im Nährmedium. Handels-

übliche Nährmedien sind üblicherweise mit NaHCO

3

gepuffert. Über den gemessenen pH-Wert im Medi-

um lässt sich auf die CO

2

Konzentration schließen. Nach Abbildung 24 können Sie die Beziehung zwi-

schen gemessenem pH-Wert im NaHCO

3

gepufferten Medium und der abzuleitenden CO

2

Konzentration

in Vol.-% ablesen.

Solche Prüfsysteme sind nicht zur Kalibrierung der BINDER Sensoren geeignet.

Empfohlenes Vorgehen:

Probe für einen 1/2 Tag unter den gleichen Bedingungen wie die Zellkulturen in einer Zellkulturflasche

oder in einem 50 ml Falcon-Röhrchen mit offenem Deckel inkubieren.

Nach der Begasung Probe aus dem CO

2

-Inkubator entnehmen und den pH-Wert innerhalb von 5

Minuten mit einer Glaselektrode messen.
Während der Messung sollte das Medium möglichst keinen Oberflächenkontakt zur Umgebung haben,

so dass das CO

2

nur wenig heraus diffundieren kann. Messungen die nach einer Zeit von 5 Minuten

durchgeführt werden können keine hinreichende Messergebnisse mehr garantieren.

Zur Messung können alternativ auch pH-Messstreifen benutzt werden (pH-Bereich 6 bis 8, nicht-blutend).

4

6

8

10

12

14

16

18

2

3,70

g/l NaHCO

3

2,20

g/l NaHCO

3

0,85

g/l NaHCO

3

6.8

7.0

7.2

7.4

7.6

pH-Wert

Vol.% CO

2

0,35

g/l NaHCO

3

1,20

g/l NaHCO

3


Handelsnamen von Kulturmedien:

DMEM

BME

MEM

Medium 199

Mc Coy

F10

F12

NaHCO

3

[g/l]

3,70

2,20

2,20

2,20

2,20

1,20

1,20

Abbildung 24: pH-Wert handelsüblicher NaHCO

3

gepufferter Medien als Funktion der CO

2

Konzentration

Beispiel: Wenn ein pH von 7,2 in einem Medium gemessen wird, das mit 2,20 g NaHCO

3

pro Liter gepuf-

fert wird, beträgt die CO

2

Konzentration in der Umgebung des Mediums 8 Vol.-%.

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