Reagenzien, Gating, Platten – Luminex xPONENT 4.01 SP1 Benutzerhandbuch

Seite 19

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Einführung

Reagenzien

Formulierte Reagenzien dürfen außer den xMAP-Mikrokugeln keine Partikel enthalten.
Weder xMAP-Kalibratoren noch Bestätigungsreagenzien dürfen verdünnt werden.

Gating

Gate-Positionen hängen von der Pufferzusammensetzung ab. Alle Änderungen an der
Pufferzusammensetzung in einem Assay können zu einer unterschiedlichen optimalen
Gate-Position führen.

Bestimmen Sie während der Assay-Entwicklung das Gating auf dem Doublet-
Discriminator-Kanal für das Assay. Die numerischen Werte erscheinen auf der linken
Seite des Histogramms. Verwenden Sie die numerische Gate-Position, die bei der
Assay-Entwicklung festgelegt wurde, um die Gate-Position im Protokoll einzustellen.

Gating-Informationen können sich ändern, wenn ein neues Los an xMAP-Mikrokugeln
benutzt wird. Jedes Mal, wenn Sie ein neues Los xMAP-Mikrokugeln erhalten, sind diese
mit den aktuellen Protokollen abzugleichen. Wenn sich die Gating-Informationen geändert
haben, erstellen Sie ein neues, mit dem gegenwärtigen Protokoll identisches Protokoll,
das eine neue Versionsnummer aufweist und neue Gating-Informationen enthält. Bei
der Bearbeitung eines xMAP-basierten Kits folgen Sie den Anweisungen auf der
Produktbeilage des Kits oder verwenden Sie das mitgelieferte Softwareprotokoll.

Platten

Wenn Sie unbedeckte Platten verwenden, benutzen Sie vorzugsweise schwarze
undurchsichtige Platten, um das Ausbleichen (Photobleaching) zu reduzieren.

Bei Assays mit erwärmten Proben verwenden Sie dünnwandige CoStar

®

Thermowell

®

Polykarbonatplatten mit 96 Kavitäten, Modell P-Platten, Eppendorf

®

-Mikrotiterplatten mit

384 Kavitäten, Katalognummer 951020737 oder äquivalent. Bei Assays mit erwärmten
Proben mit einer Mikrotiterplatte mit 384 Kavitäten empfehlen wir ebenfalls, die Platte mit
durchstechbarer Plattenfolie abzudecken.

Für nicht erwärmte Assays wählen Sie eine Mikrotiterplatte mit 96 Kavitäten oder eine
Mikrotiterplatte mit 384 Kavitäten mit einer Gesamthöhe von höchstens 25,4 mm. Siehe
„Mikrokugelkonzentration“ auf Seite 5.

Weitere Informationen finden Sie in der Liste empfohlener Verbrauchsmaterialien
auf der Website von Luminex unter
http://www.luminexcorp.com/support/recommendedmaterials/index.html.

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