Probenvolumen – Luminex xPONENT Benutzerhandbuch
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Überblick
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Fluoreszenzsignal der an der Oberfläche jedes Mikrokugelsatzes
gebundenen Reportermoleküle wird gemessen und dient zur
Bestimmung des Ergebnisses für jeden Assay in einem Multiplex.
Weil jede Mikrokugel einzeln analysiert wird, gilt also, dass die
Reportersignale für jeden Mikrokugelsatz genau quantifiziert werden
können.
Die folgende Tabelle zeigt akzeptable Reporterfluorochrome und
deren Anregungs- und Emissionswellenlängen.
Probenvolumen
Probenvolumen bzw. -größen reichen von 20 bis 200 µl.
Vergewissern Sie sich, dass nach der Aspiration etwas Probe in der
Kavität verbleibt. Verwenden Sie ein Volumen von ca. 25 µl über
dem Probenvolumen. Diese Menge kann je nach dem verwendeten
Plattentyp variieren. Nach der Aufnahme wäscht das Luminex-
Analysegerät die Probenleitungen und spült ca. 160 µl der
Hüllenflüssigkeit zurück in die Kavität. Vergewissern Sie sich, dass
genug Platz vorhanden ist, um diese Menge wieder in die Kavität
aufzunehmen, ohne dass die Kavität überläuft und andere Kavitäten
kontaminiert werden.
Reporterfluorochrom-Wellenlängen
R-Phykoerythrin
Alexa 532
Formelgewicht (Daltons)
240.000
470
Max. Absorption (nm)
480.546.565
531
Max. Extinktion (M
-1
cm
-1
)
1.960.000
83.800
Max. Emission (nm)
578
554
Quantenausbeute
0,82
0,8