Leica Biosystems HER2 FISH System - 30 Test - Handbuch (Seite 22)

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Leica Biosystems Leica HER2 FISH System - 30 Test Bedienungsanleitung TA9217 DE-CE-Rev_D 08/04/2013
Fehlerbehebung
Problem Wahrscheinliche Ursache Fehlerbehebungsmaßnahme
Kein(e) oder
schwache(s)
Fluoreszenzsignal/
Färbung
Unzureichende Fixierung oder
Infiltration der Testprobe
Stellen Sie sicher, dass ein Fixiermittel auf
Formalinbasis verwendet wird und dass die
Verarbeitungsabläufe für die zu testende Probe
geeignet sind.
Das Leica HER2 FISH System-
30 Test wird nach Ablauf des
Verfallsdatums verwendet.
Es ist darauf zu achten, dass das Verfallsdatum
des verwendeten Leica HER2 FISH System - 30
Test nicht überschritten wird.
Falsche Protokollauswahl Stellen Sie sicher, dass im Färbeprotokollfeld
des Dialogs "OT hinzufügen" der Standardwert
*FISH Protocol A ausgewählt ist.
Abgabe ungeeigneter
Vorratsreagenzien
Stellen Sie sicher, dass alle Leica BOND-
Reagenzien den richtigen Vorratsbehältern
zugeordnet und an den richtigen Positionen in
das Gerät eingesetzt wurden.
Unzureichende Entparaffinierung
von Objektträgern
Stellen Sie sicher, dass der Modus *Dewax im
Feld "Preparation" des Dialogs "OT hinzufügen"
ausgewählt ist.
Unzureichende Vorbehandlung Stellen Sie sicher, dass die
Standardvorbehandlungsprotokolle (HIER und
Enzymatic Digestion) ausgewählt sind.
Ggf. ist das Vorbehandlungsprotokoll (HIER oder
Enzymatic Digestion) anzupassen.
Unzureichende Denaturierung Stellen Sie sicher, dass eine geeignete
Standarddenaturierung *D10 ausgewählt ist.
Unzureichende Hybridisierung Stellen Sie sicher, dass eine geeignete
Standardhybridisierung *H12 ausgewählt ist.
Ggf. ist die Hybridisierungsdauer zu erhöhen.
Zu langes Waschen nach der
Hybridisierung
Waschdauer nach der Hybridisierung
verringern.
Färbelauf vor dem Abschluss
abgebrochen
Prüfen Sie mithilfe der Leica BOND Software,
ob während des Färbelaufs Fehler gemeldet
wurden, und beheben Sie sie nach den von
der Leica BOND Software ausgegebenen
Anweisungen.
Ungeeignetes
Fluoreszenzmikroskopzubehör
•
Ungeeigneter Filtersatz
• Falsche Lampe
• Schwache Lampe
• Falscher Öltyp
Stellen Sie sicher, dass für den
durchzuführenden Assay geeignetes
Fluoreszenzmikroskopzubehör verwendet wird:
•
Geeigneter Filtersatz
• Geeignete Lampe
• Lampe mit ausreichender Leuchtstärke
• Für Ölimmersionsmikroskopie geeignetes
Öl
Zu starke Einwirkung von
UV-Licht (Photobleichung)
Bewahren Sie die Objektträger zum Erhalt
der Fluoreszenzsignale vor und nach der
Auswertung im Dunkeln auf. Zum langfristigen
Signalerhalt empfiehlt sich eine Lagerung bei
–20 °C.