Leica Biosystems HER2 FISH System - 30 Test - Handbuch (Seite 8)

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Leica Biosystems Leica HER2 FISH System - 30 Test Bedienungsanleitung TA9217 DE-CE-Rev_D 08/04/2013
F.Verfahrensschritte
Zusätzlich zu den folgenden Anweisungen ist das Benutzerhandbuch zum Leica BOND-
MAX and BOND-III System heranzuziehen. Für jeden Objektträger ist ein neues Deckglas
Leica BOND Universal Covertile zu verwenden.
Die Verwendung von Leica BOND Universal Covertiles, die zuvor bei der
immunhistochemischen Färbung oder Färbung mit In-situ-Hybridisierung eingesetzt
wurden, wurde für diesen Test nicht validiert.
1. Stellen Sie sicher, dass die Vorrats- und Abfallbehälter am Leica BOND-MAX and BOND-
III System genügend Aufnahmekapazität für die erforderlichen Färbeläufe haben.
2. Stellen Sie sicher, dass genügend Alkohol, destilliertes oder entionisiertes Wasser, Leica
BOND Dewax Solution, Leica BOND Epitope Retrieval Solution 1 und Leica BOND Wash
Solution für die erforderlichen Färbeläufe in den Vorratsbehältern vorhanden ist.
3. Vergewissern Sie sich, dass eine saubere Leica BOND Mixing Station installiert ist.
4. Schalten Sie das Leica BOND-MAX and BOND-III System ein.
5. Schalten Sie den mit dem Leica BOND-MAX and BOND-III System verbundenen PC
ein.
6. Starten Sie die Leica BOND Software.
7. Scannen Sie zur Verwendung eines neuen Leica HER2 FISH System - 30 Test Kits
den Barcode am Reagenzienschlitten mit dem Handscanner, um das System in den
Reagenzienbestand des Leica BOND einzugeben (nur Einzelbarcode).
8. Bereiten Sie Leica BOND Enzyme 5 im mitgelieferten Leica BOND Open Container in
einer Verdünnung von 1:300 vor. Geben Sie beispielsweise für 10 Objektträger 10 µl
Leica BOND Enzyme Concentrate 2 zu 2990 µl Leica BOND Enzyme Diluent hinzu.
9. Scannen Sie den mitgelieferten Leica BOND Open Container ein und registrieren Sie
ihn als Bond Enzyme 5.
10. Öffnen Sie den Bildschirm "Add Slide" und klicken Sie auf Fall hinzufügen.
11. Geben Sie die Details des ersten Falls ein. Das Dispensiervolumen sollte auf 150 µL und
das Vorbereitungsprotokoll auf *Dewax eingestellt sein. Klicken Sie auf OK.
12. Klicken Sie im Bildschirm "Add Slide" auf OT hinzufügen, während der Fall hervorgehoben
ist.
13. Fügen Sie zuerst die Testobjektträger der Patienten hinzu. Der Gewebetyp sollte auf
Test-Gewebe gesetzt sein.
14. Wählen Sie den Färbemodus Einzel aus.
15. Wählen Sie die Funktion ISH aus.
16. Wählen Sie *LSI HER2/CEP17 Dual Probe – 30 Test aus der Sondenliste aus. Auf der Registerkarte
"Protocols" wird standardmäßig das richtige Färbeprotokoll (*FISH Protocol A), HIER-Protokoll
(*HIER 25 min with ER1 (97)) und EIER-Protokoll (*Enzyme 5 for 25 min) mit den richtigen Werten für
Denaturierung (*D10) und Hybridisierung (*ISH Hybridization (12Hr)) angezeigt.
17. Wiederholen Sie Schritt 10 bis 16, bis Patienten-Testobjektträger und Kontrollobjektträger
(Leica HER2 FISH Control Slides und/oder interne Kontrollobjektträger) erstellt wurden.
Drucken Sie Objektträgeretiketten aus.
18. Versehen Sie die Objektträger mit geeigneten Etiketten.
19. Öffnen Sie die Deckel aller Behälter des Leica HER2 FISH System - 30 Test und setzen
Sie den Reagenzienschlitten in das Leica BOND-MAX and BOND-III System ein.
20. Decken Sie die Objektträger mit neuen Covertiles ein.
21. Setzen Sie den Objektträgerschlitten in das Leica BOND-MAX and BOND-III System ein
und drücken Sie Lade/Entlade.
22. Vergewissern Sie sich, dass die Objektträger gescannt wurden, und klicken Sie im
Systemstatusbildschirm auf Run (Play), um den Lauf sofort zu starten (für das Leica HER2 FISH
System - 30 Test wird die Ausführung über Nacht unter Verwendung der Startverzögerung
empfohlen).
23. Vergewissern Sie sich, dass im Schlittenindikatorfeld Läuft (OK), die Chargennummer und
der Endzeitpunkt angezeigt werden.
24. Drücken Sie nach Abschluss des Färbelaufs Lade/Entlade und entnehmen Sie die
Objektträgerschlitten aus dem Leica BOND-MAX and BOND-III System.
25. Entfernen Sie die Covertiles und spülen Sie die Objektträger in entionisiertem Wasser.