Leica Biosystems Bond Oracle HER2 IHC System - Handbuch (Seite 15)

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Leica Biosystems Bond Oracle HER2 IHC System Instructions for Use TA9145 DE-CE-Rev_E 18/06/2013
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Ersetzen Sie die im Bond Oracle HER2 IHC System enthaltenen Reagenzien nicht durch
andere Komponenten (von Leica Biosystems oder anderen Herstellern). Dadurch würde der
Assay seine Aussagekraft verlieren.
Alle in den Abschnitten C bis E (Vorgehensweise) beschriebenen Schritte müssen in
der angegebenen Reihenfolge ausgeführt werden. Durch jede Abweichung von dieser
Reihenfolge verliert der Assay seine Gültigkeit.
Für den Assay dürfen nur mit formalinhaltigen Fixiermitteln behandelte Gewebe verwendet
werden. Durch Verwendung anderer Fixiermittel würde der Assay seine Gültigkeit verlieren.
Mit Gewebepräparaten, deren Dicke außerhalb des empfohlenen Bereichs liegt, wurde das
System nicht getestet. Durch die Verwendung von Schnitten anderer Dicke verliert der Assay
möglicherweise seine Gültigkeit.
Zellliniendaten
Zelllinie Profil des Bond
Oracle HER2 IHC
System HER2
Rezeptordichte
pro Zelle* Status der HER2 Genverstärkung +
HER2 Kopienan­
zahl HER2:Chr17
Genverhältnis
SK-BR-3 3+ 4,3x10 5 13,35 3,55
MDA-MB-453 2+ 1,4x10 5 5,73 2,05
MDA-MB-175 1+ 6,3x10 4 3,33 1,20
MDA-MB-231 0 9,3x10 3 3,15 1,13
*Analyse der HER2 Rezeptordichte mithilfe von Durchflusszytometrie. + Bestimmung des Status der HER2 Genverstärkung mithilfe
von Dual Probe (HER2:Chromosom 17) FISH.
Tabelle 5. Profil des HER2 Control Slide
Klinische Konkordanz zwischen Bond Oracle HER2 IHC System und
Dako Hercep Test
Im ersten Teil der Studie wurde die Eignung des Bond Oracle HER2 IHC System als Hilfsmittel
bei der Entscheidung über eine Therapie mit Herceptin® (trastuzumab) untersucht. Die Studie
war dafür konzipiert, die Konkordanz zwischen dem Bond Oracle HER2 IHC System und dem
Dako HercepTest (dem Goldstandard für diesen Assay) zu ermitteln. Als Akzeptanzkriterium
wurde eine Gesamtkonkordanz von mehr als 75 % zwischen den beiden Tests (mit einem
95 %-Konfidenzintervall (KI)) definiert.
Die Studie wurde als Blindstudie an zwei Standorten in den USA durchgeführt. Jedes der beiden
Untersuchungslabors wurde mit formalinfixierten, in Paraffin eingebetteten Brustkrebsproben mit
bekanntem HER2 Status ausgestattet. Die Fälle wurden in umgekehrter Reihenfolge aus den
klinischen Archiven ausgewählt und repräsentierten den kontinuierlichen Zustrom von Fällen für
klinische Tests in einer Histopathologieabteilung. Sie wurden unabhängig von anderen prognostischen
und/oder prädiktiven Faktoren getestet, und es lag kein Bias in der Kohorte vor. In Labor 1 und
Labor 2 wurden Kohorten von 160 bzw. 292 Proben getestet. In den einzelnen Kohorten waren
die mehrdeutigen/positiven (2+, 3+) und negativen (0, 1+) Fälle (auf der Basis zuvor zugeordneter
HER2 IHC Werte) in gleicher Anzahl vertreten, woraus sich eine Gesamtuntersuchungspopulation
von 452 Proben ergab. Zwölf Proben wurden wegen nicht ausreichendem invasivem Tumorgewebe
als ungeeignet eingestuft und aus der Studie entfernt. Weitere neun (9) Proben konnten aufgrund
von Gewebeablösung von der Objektträgeroberfläche nicht eingestuft werden, sodass sich die
endgültige Untersuchungspopulation auf 431 Proben verringerte.