Leica Biosystems Bond Oracle HER2 IHC System - Handbuch (Seite 4)

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Leica Biosystems Bond Oracle HER2 IHC System Instructions for Use TA9145 DE-CE-Rev_E 18/06/2013
Bestimmung der Überexpression des Onkoproteins HER2 wurde in einer unabhängigen Studie
untersucht, bei der die mit dem Bond Oracle HER2 IHC System erzielten Ergebnisse mit den
Ergebnissen des Dako HercepTests in Bezug auf 431 Brusttumorproben amerikanischen
Ursprungs verglichen wurden. Keine dieser Tumorproben stammte von Patientinnen, die an
den klinischen Herceptin® Studien teilnahmen. Dabei ergab sich eine Konkordanz von 92,34 %
bei der 2x2-Analyse (95 % Konfidenzintervalle von 89,42 % - 94,67 %) und von 86,54 % bei der
3x3-Analyse (95 % Konfidenzintervalle von 82,95 % - 89,62 %) zwischen den Ergebnissen der
beiden Assays.
Verfahrensprinzip
Das Bond Oracle HER2 IHC System enthält Komponenten, die zur Durchführung einer
immunhistochemischen Färbung formalinfixierter, in Paraffin eingebetteter Gewebeproben
erforderlich sind. Nach der Inkubation mit dem gebrauchsfertigen HER2 Primary Antibody
(Klon CB11) kommt bei diesem System gebrauchsfertige Compact Polymer-Technologie zur
Anwendung. Die enzymatische Umwandlung des anschließend hinzugefügten Chromogens führt
zur Bildung eines sichtbaren Reaktionsprodukts am Ort der Antigenbindung. Die Gewebepräparate
können anschließend gegengefärbt, dehydriert, geklärt und mit Deckglas versehen werden. Die
Ergebnisse werden mithilfe eines Lichtmikroskops ausgewertet. Zur Bewertung der Färbeläufe
werden Kontrollobjektträger mit vier formalinfixierten, in Paraffin eingebetteten humanen
Brustkrebszelllinien bereitgestellt. Die vier Zelllinien zeigen eine Expression des Onkoproteins
HER2 mit einer Intensität von 0, 1+, 2+ und 3+. Die Färbeintensität dieser Zelllinien entspricht
sowohl der HER2 Rezeptordichte pro Zelle als auch dem Status der HER2 Genverstärkung. Das
Bond Oracle HER2 IHC System (Produktcode TA9145) ist für den Einsatz im Leica Biosystems
BOND Färbeautomaten vorgesehen.
Gelieferte Komponenten
Die nachfolgend aufgeführten Materialien (Tabelle 1) reichen zum Färben von 150 Objektträgern
aus (60 mit HER2 Primary Antibody inkubierte Testobjektträger, 60 entsprechende, mit HER2
Negative Control inkubierte Testobjektträger, 15 mit HER2 Primary Antibody inkubierte HER2
Control Slides und 15 mit HER2 Primary Antibody) inkubierte interne Positivgewebekontrollen.
Die Anzahl der Tests basiert auf der Annahme, dass pro Objektträger 150 µL automatisch
dosiert werden. Das Kit enthält für maximal 15 BOND Färbeläufe ausreichende Materialien.
HER2 Control Slides,
(x15)
Aus formalinfixierten, in Paraffin eingebetteten humanen Brustkrebs-
Zelllinien hergestellte Schnitte, die bei Färbung gemäß dem
mitgelieferten Protokoll eine Expression des Onkoproteins HER2 mit
einer Färbeintensität von 0, 1+, 2+ und 3+ zeigen. Diese Schnitte sind
vollständig adhärent und müssen nicht weiter aushärten.
HER2 Primary
Antibody, 13.5 mL
Enthält gebrauchsfertigen, affinitätsgereinigten, monoklonalen
Maus-IgG-Antikörper, Klon CB11 und 0,35 % ProClin
™
950 .
HER2 Negative
Control, 9 mL
Enthält gebrauchsfertigen Maus-IgG-Antikörper in einer dem HER2
Primary Antibody äquivalenten Konzentration und 0,35 % ProClin
™
950.
Peroxide Block,
22.5 mL
Enthält 3-4 % Wasserstoffperoxid
Post Primary, 22.5 mL
Kaninchen-Anti-Maus-IgG (<10 μg/mL) mit 10 % (v/v) tierischem
Serum in TRIS-gepufferter physiologischer Kochsalzlösung und
0,09 % ProClin
TM
950.