YSI 600R Benutzerhandbuch

Seite 298

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Funktionsprinzipien

Abschnitt 5

WTW

Bedienungsanleitung für Umweltüberwachungssysteme

5-40

Die Grenzen der in vivo-Methode sind unten aufgeführt und müssen sorgfältig berücksichtigt werden, bevor

BGA-Bestimmungen mit der Sonde und dem Sensor durchgeführt werden. Einige der

Ungenauigkeitsursachen können minimiert werden, indem die Daten des 6132 mit den Daten aus der

Standard-Laboranalyse einiger Proben, die man während einer Probennahme oder Überwachungsstudie

erhalten hat, kombiniert werden. Die in vivo-Studien können niemals das Standardverfahren ersetzen. Die

Schätzungen der BGA-Konzentration aus dem einfach zu verwendenden PE-Messkopf sind eher so

gestaltet, dass sie die genaueren (aber schwieriger zu erlangenden) Resultate aus traditionelleren Methoden

der BGA-Bestimmung ergänzen. Der 6132-Sensor passt ideal zur Überwachung der relativen

Veränderungen (zeitlich oder räumlich) in der PE-enthaltenden BGA-Population.

Messung der PE-enthaltenden BGA In Vivo

Eine Haupteigenschaft der Phycoerythrin-enthaltenden BGA ist es, dass die Zellen fluoreszieren, das heißt,

wenn sie mit Licht einer bestimmten Wellenlänge angestrahlt werden, strahlen sie ein Licht höherer

Wellenlänge (oder niedrigerer Energie) zurück. Die Fähigkeit des PE zu fluoreszieren, wenn es in ganzen

BGA-Zellen vorhanden ist, ist die Basis aller handelsüblichen Fluorometer, die in der Lage sind, den

Analyten in vivo zu messen. Diese Instrumente bringen das PE dazu zu fluoreszieren, indem sie einen

Lichtstrahl der entsprechenden Wellenlänge in die Probe leiten und dann die höhere Wellenlänge, die als

Folge des Fluoreszenzprozesses ausgestrahlt wird, messen. Der 6132 PE-Messkopf verwendet für den

Anregungsprozess eine Diode (LED), die grünes Licht ausstrahlt. Bei einer Bestrahlung mit diesem grünen

Licht geben die in den ganzen Zellen enthaltenen PE-Moleküle ein Licht im Spektralbereich 565-610 nm

ab. Um diese Fluoreszenz zu quantifizieren ist der Systemdetektor gewöhnlich eine Photodiode mit hoher

Empfindlichkeit, die durch einen optischen Filter, der das festgestellte Licht verengt, gefiltert wird. Der

Filter verhindert, dass das grüne Erregerlicht festgestellt wird, wenn es von den Partikeln im Wasser

zurückgeworfen wird. Ohne den Filter würde trübes (wolkiges) Wasser so aussehen, als gäbe es darin

erhebliche Anteile an PE-enthaltenden BGA, obwohl keine vorhanden sind. Das folgende Diagramm kann

verwendet werden, um die Gesetzmäßigkeiten des Systems besser zu verstehen.

Das einzelne 6132 BGA-System besteht aus einem Messkopf, der mit den optischen Sonden-Anschlüssen

aller 6-Serien-Sonden kompatibel ist. Das Ergebnis des Sensors wird automatisch über die Sonden-

Firmware verarbeitet, um Messwerte entweder in generischen Fluoreszenz-Einheiten (RFU) oder Zellen/ml

der PE-enthaltenden BGA bereitzustellen. Wie alle optischen Messköpfe ist der 6132 mit einem

mechanischen Wischer ausgerüstet, der die optische Oberfläche von Zeit zu Zeit entweder durch manuelle

Aktivierung oder automatisch reinigt. Mit diesem Merkmal kann der 6132-Sensor mehrere Wochen im

Glasfaser

Photodetektor

Lichtquelle

Grüne LED

Optischer Filter

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