Luminex 100 IS User Manual, Version 2.3 - Handbuch (Seite 43)

Best.-Nr. 89-00002-00-074 Rev. B 4-1
Grundlagen
Hintergrund-
informationen
Die xMAP-Technologie ist ein vielseitiges System zur Messung von
löslichen Analyten. Das Luminex 100 IS-System führt gleichzeitige
Einzelmessungen von mehrfachen Reaktionen auf den Mikrokugeln
eines einzigen Probenaliquots durch.
Weiterführende Informationen zu
diesem Funktionsprinzip finden Sie in Practical Flow Cytometry, 3.
Ausgabe, Howard M. Shapiro, M.D. (New York: Wiley-Liss Inc., 1995).
Fluidik
Das Luminex 100-Analysegerät weist zwei verschiedene fluidische
Verlaufswege auf. Zum ersten Verlaufsweg gehört ein
spritzengetriebener Mechanismus, der die Probenaufnahme steuert.
Dieser Mechanismus ermöglicht die Aufnahme winziger Mengen
von Probenmaterial aus sehr kleinen Reaktionsvolumen. Das
spritzengetriebene System überträgt ein bestimmtes Probenvolumen
von einem Probenbehälter auf eine Küvette. Die Probe wird zur
Analyse mit einer beständigen Rate in die Küvette eingespritzt. Nach
der Analyse wird der Verlaufskanal der Probe automatisch mit
Hüllenflüssigkeit aus dem zweiten fluidischen Verlaufsweg
durchgespült. Dieser Vorgang entfernt auf effektive Weise sämtliche
Überreste der Probe aus den Schlauchverbindungen, Ventilen und
der Sonde. Etwa 160 µl Hüllenflüssigkeit wird nach der Aufnahme
der Proben in jede Kavität gegeben. Der zweite fluidische
Verlaufsweg wird durch Luftüberdruck betrieben und befördert die
Hüllenflüssigkeit in die Küvette und den Verlaufskanal der Probe.
Anregung
Das Anregungssystem im Luminex 100-Analysegerät enthält zwei
Festkörperlaser. Ein Reporterlaser regt die fluoreszierenden
Moleküle, die an die biologischen Reaktanten an der Oberfläche
der xMAP-Mikrokugel gebunden sind, an, während der
Bestimmungslaser die Fluorochrome anregt, die in der
xMAP-Mikrokugel eingebettet sind. Die Laserstrahlen beleuchten
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